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Laboratorio-de-Microscopia

Laboratorio de microscopía e imagenología    
       
Jefe de Laboratorio: Dra. Brenda Hildeliza Camacho Díaz Ext: 82522  
       
Objetivo: Proporcionar el servicio de Microscopia fotónica y de epifluorescencia, Procesos histológicos y tratamiento digital de imágenes a los Departamentos Académicos del Centro de Desarrollo de Productos Bióticos, otros centros de estudio del IPN y externos
 
     
Actividades: El laboratorio ofrece como herramientas de investigación a la microscopía estereoscópica, fotónica y de epifluorescencia así como procedimientos histológicos y de Tratamiento Digital de Imágenes con aplicaciones a diversas áreas de estudio como biotecnología y bioquímica vegetal, alimentos, farmacología, salud y biomateriales con la finalidad de apoyar a la generación de nuevos conocimientos científicos de alto impacto.  
  En particular dentro del laboratorio se desarrollan de manera rutinaria las siguientes actividades:
 
  • Proceso de inclusión en parafina
  • Cortes histológicos con microtomo rotacional.
 
  • Captura digital de micrografías (campo claro, contraste de fases, luz polarizada, epifluorescencia).
  • Procedimientos de histoquímica en tejidos animales, vegetales y biomateriales.
 
 
  • Análisis microestructurales y morfométricos mediante tratamiento digital de imágenes.
 
       
Principales equipos:
  • Microscopio Óptico Nikon Eclipse 80i (Japón). Con cabezal y zoom digital de 2X, con cámara de video, controlador e interfase acoplada a PC (Data image DS33, Japón); con unidad de Epi-fluorescencia con filtros de excitación para 330-380 nm, 450-490 nm y 510-560 nm. Zoom óptico adicional de 2.5X

  • Microscopio Óptico Nikon Alphaphot-2 (Japón); con cámara de video (CMOS color, un chip) acoplada a computadora, con accesorios para contraste de fases, campo oscuro y polarización de luz
 
 
  • Microscopio estereoscópico Nikon, SMZ-1500, con cámara de video, controlador e interfase acoplada a PC (Data image DS33, Japón), con unidad de Epi-fluorescencia con filtro de excitación para 420-490 nm y 470 nm (GPF). Objetivos 1 y 1.5 X, intervalo de zoom óptico de 0.75X a 11.25X y una relación de aumento 15:1; iluminación mediante luz diascópica y coaxial por fibra óptica
  • Cámara digital Coolpix-900 (Nikon), memoria CompactFlash de 1 Gb, con adaptador tipo "Y" para microscopio. Cámara digital Sony, CyberShot, zoom óptico 12X, lente Carl Zeiss, 2.8 - 3.7/6-72; lente macro, polarizador y close-up.Mini-Cámaras de tecnología CMOS, color y monocromáticas de 570 líneas de TV de resolución
 
 
  • Sistema de inspección visual asistida por computadora (IVAC), para nueve cámaras y software para programación de captura y almacenamiento de imágenes digitales (hasta cinco eventos simultáneos).
  • Microtomo Rotacional Leica RM 2125 RT
 
   
Técnicas principales:
  • Imagenología a través de tratamiento digital de imágenes: captura, pre-procesamiento, binarización, extracción de objetos y medición de éstos; aplicación de conceptos de dimensión fractal para la evaluación de la irregularidad de objetos y textura topográfica de imágenes digitales de microscopía óptica y de barrido.
  • Proceso de inclusión en parafina: mediante el cual se deshidrata la muestra a diferentes gradientes de concentración de etanol, y posteriormente en xileno, para finalmente embeber la muestra en parafina, dentro de unos cassettes de inclusión, y de esa manera conservar mejor el tejido.

 
 
  • Cortes histológicos: que se llevan a cabo mediante un microtomo de rotación, el cual mediante una navaja va cortando el tejido a razón de micras. Cuando el corte se ha obtenido se introduce en un baño de agua destilada y grenetina a 40ºC. Posteriormente, el corte se coloca en un portaobjetos. Y pasaremos al proceso de tinción y montaje usando diferentes colorantes, resina sintética y cubreobjetos.
  • Técnicas de tinción histológicas generales: hematoxilina-eosina, safranina "O", verde rápido, azul de toluidina, fucsina ácida, fucsina básica, cristal violeta, yodo IKI, verde metilo, sudan IV, hematoxilina de Harris, orange G, lugol y verde de malaquita
 
 
  • Histoquímica: Detección de lignina, polisacáridos insolubles-proteínas, almidón, taninos y depósitos calcáreos; constituyentes de la pared celular
   
       

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